6 分钟高纯 RNA 提取试剂盒ZS-M11005

组分：

储存：组分全部室温避光保存，试剂盒保质期 2 年。

简介：本提取试剂盒采用基于异硫氰酸胍/苯酚法的优化的独特的裂解液，RNA   与硅胶膜离心柱特异地结合，快速高效从组织、细胞、病毒液样本中纯化出高纯 度的总 RNA ，高效特异性去除细胞中基因组 DNA 和蛋白质，获得高纯度 RNA， 稳定性好。总 RNA 包括大于 200 个核苷酸的 RNA(也常被称为总 RNA)和小于  200 个核苷酸的小 RNA(small RNA) 。本试剂盒具有高效、快速、方便的特点，

总时长仅需 6 min 左右。是目前国际上操作步骤最少、用时最短的 RNA 提取试剂盒之一。获得的 RNA 可直接用于反转录、基因克隆、定量检测、体外翻译、RNase protection assay,  也可用于基因表达芯片分析(microarray) 、文库构建、杂交等多种分子生物学实验。

注意事项：

(1)  本试剂盒中的 Washing Buffer  中已经加乙醇，无需单独添加。

(2) Solution R1 和 Solution R2 均具有腐蚀性，注意防护。

操作方法：

（1）裂解/上柱（1.5ml EP  管中处理）

细胞（处理细胞量：105<细胞<107 ）：贴壁细胞胰酶消化完毕后，离心收集细胞沉淀，悬浮细胞直接离心收集细胞沉淀，用 20~30μl  水或 PBS 重悬细胞沉淀（务必重悬充分）。加入 120--300μl Solution R1（根据处理细胞数量调整本组分用 量，参考以下备注列表）漩涡混匀 30s裂解细胞(若有未溶解的细胞团块要吹打，助溶解。同时适当延长裂解时间以增加 RNA 提取产量) 。13000 rpm  离心 30s，吸取 200~250μl 上清到新的 EP 管中（不要吸入沉淀），加入 500μl Solution R2上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000 rpm  离心 30s ，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

备注：

组织(<10mg)：组织样本可采取以下两种方式进行：a ）取不超过 10 mg 的组织样本，用液氮研磨粉碎组织样本，将研磨粉碎的样品加到 150μl Solution R1 中，漩涡混合均匀 30s（若有块状组织未溶解，使用枪头吹打，助消化，消化困难的可增加消化时间约 5min 左右）。13000rpm  离心 15s ，吸取 120μl  上清到新的EP 管中，加入 500μl Solution R2 上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000rpm 离心 30s ，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。b）取 10-30 mg 组织样本，加入到 300μl Solution R1 中（1.5ml EP  管），并加入几粒钢珠，置于组织研磨仪中，研磨 1~2min 。研磨完毕后 13000rp 离心 15s，取 120μl~200μl  上清到新的EP 管中（不要吸入未裂解的组织块），加入 500μl Solution R2 上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中，13000rpm 离心 30s，弃废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

病毒液/体液：吸取 150μl 病毒液/体液样品到加入到 120μl Solution R1 中，漩涡混合均匀 30s。直接加入 500μl Solution R2 中，漩涡混合均匀 15s。倒入吸附柱中，13000rpm  离心 30s ，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

细菌：收集菌体后，使用 20~30μl  水重悬菌体（务必重悬充分）,加入 120μl Solution R1 漩涡混匀 30s，加入 500μl Solution R2 上下颠倒混合均匀，倒入吸附柱中。13000rpm 离心 30s，倒掉废液，进行后续洗涤/洗脱步骤。

（2）洗涤和洗脱

向吸附柱中加入 500μl RNA Washing Buffer，13000rpm  离心 15s。重复此步骤 一次。将吸附柱重新放回离心机，13000rpm  空离心 1min ，将残留的乙醇彻底 甩干。将吸附柱芯放入到 1.5 mL Nuclease Free 收集管中，向吸附柱芯中加入 20~50μl Nuclease Free H2O，室温放置 1min ，13,000rpm  离心 1min ，洗脱液即为提取的 RNA，冷冻保存（推荐使用：）。

Fig 1.使用 Superbrilliant® 6 min High-quality RNA Extraction Kit 提取的小鼠脾细胞 RNA