TRI LS RNA 裂解液 ZS-M11007
Superbrilliant® TRI LS RNA 裂解液
Superbrilliant® TRI LS RNA Reagent
Cat. No.: ZS-M11007
Superbrilliant® TRI LS RNA Reagent
Cat. No.: ZS-M11007
组分:

储存:2-8℃避光保存,可保存 2 年。
简介:Superbrilliant® TRI LS RNA 裂解液含有酚、异硫氰酸胍和其它成分,是一种专门用于从液体样本(如细菌、病毒、酵母、细胞、血液、组织悬液)中提取高质量 RNA 的试剂。与TRI RNA 裂解液相比,唯一区别在于其组分浓度,Superbrilliant® TRI LS RNA 裂解液是一种用于提取液体样本 RNA 的浓缩试剂,故提取相同量样本所需的用量相对较少。样品在 Superbrilliant® TRI LS RNA 裂解液中能够充分被裂解,在样品匀浆或裂解过程中,它可保持 RNA 的完整性,同时裂解细胞,溶解细胞内含物,提取过程方便快速,洗脱得到分子量大于 200 bp 的高纯度 RNA,整个操作在一小时内便可以完成。使用 Superbrilliant® TRI LS RNA 裂解液获得的总 RNA 含蛋白质和 DNA 污染极少,可用于 Northern Blot、反转录、ployA 筛选、RNase 保护分析和基因克隆等后续分析。
注意:
(1)请勿应用该试剂直接处理大块固体组织,否则会影响 RNA 的产量。
(2)该试剂含有强变性剂,请勿直接于皮肤接触或吞咽,若接触到皮肤或眼睛请尽快到医院处理。实验时务必穿实验服,戴手套。
自备试剂:氯仿,异丙醇,70%乙醇(DEPC 水配置),RNase Free H2O。
操作方法
实验前准备:
RNA 制备的关键是要抑制细胞中的 RNA 分解酶和防止所用器具及试剂中的 RNA 分解酶的污染。因此,在实验中必须采取以下措施:戴一次性干净手套;使用 RNA 操作专用实验台;在操作过程中避免讲话等等。通过以上办法可以防止实验者的汗液、唾液中的 RNA 分解酶的污染。
注意事项:
1. 尽量使用一次性塑料器皿,若用玻璃器皿,应在使用前用 0.1% DEPC 水溶液在 37℃处理12h,然后在 120℃高压灭菌 30 min 以除去残留的 DEPC。
2. 用于 RNA 实验的试剂,须使用干热灭菌(180℃,60 min)或 DEPC 水处理相关容器,使用的无菌水须用 0.1%的 DEPC 处理后再进行高温高压灭菌。
3. RNA 实验用的试剂和无菌水都应专用,避免混用后交叉污染。
常见问题分析
1. 抽提率低。可能原因:(a. 样品裂解或匀浆处理不彻底;b. RNA 沉淀未完全溶解)
2. A260/A280<1.65 。可能原因:(a. 检测吸光度时,RNA 样品没有溶于水,而溶于 TE 中; b. 样品匀浆时加的组织量过多;c. 分层后,吸取上清液不足 500μl;d. 吸取水相时混入了有 机相)
3. DNA 污染过多。可能原因:(a. 样品匀浆时加的试剂量太少或组织量过多;b. 样品中含
有有机溶剂)
解决方法:使用该试剂通常基因组 DNA 污染含量<0. 1ng/ μL ,如需要彻底去除 DNA 的污染, 请使用 Superbrilliant® DNase I (含 RNA 酶抑制剂)(ZS-M11009)消化去除基因组 DNA 污 染。
Fig 1.使用 TRI LS RNA Reagent 提取小鼠的血清 RNA,针对 miR-21, miR-16 进行 qPCR 检测。