NPW0109 WB免降温快速转印缓冲液盐包
WB免降温快速转印缓冲液盐包
WB temperature free rapid transfer buffer salt package
产品内容
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货号 |
品名 |
规格 |
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NPW0109 |
WB免降温快速转印缓冲液盐包 |
1000ml/袋 |
本试剂在室温储存24个月不影响使用效果。常温运输。
产品简介
本产品是用于 Western Blot 湿转法的快速湿转液盐包，在传统 WB 转膜液的基础上进行了改良，能在 400mA 恒流 10-30 分钟快速完成将蛋白转印至 NC 膜或 PVDF 膜上。与传统的湿转液相比，产热低，无需冰浴，具有快速优良的转膜特点。本产品用无水乙醇代替甲醇配置湿转液，安全无害。
使用说明
- 需配置 1×WB 免降温快速湿转液。首先准备一个洁净的容器，撕开盐包袋后全部倒入，加入 500mL 蒸馏水，再加入 200mL 无水乙醇，最后倒入蒸馏水或者超纯水定容至 1L，可得到 1L 的 1×WB 免降温快速湿转液。
2. 将 NC 膜、PVDF 膜（需用甲醇或者乙醇激活膜）浸泡在配置好的转膜缓冲液中。
3. 将转印所需的物品以负极为底（一般为黑色），按照海绵、支撑纸、转印膜、跑完电泳的 PAGE 凝胶、支撑纸、海绵的顺序依次摆放，根据摆放的凝胶位置用圆珠笔在转印膜上标注孔位，然后转移至电泳槽中（插入装置时保证转印膜朝向转印槽正极），注意摆放过程中不要出现气泡，避免影响蛋白从 PAGE 胶上转印到膜上。倒入 1×WB 免降温快速湿转液，湿转液要没过转印膜。将电泳槽设置 400mA 恒流， 电泳 15-30 分钟即可（针对 1.0mm 厚的凝胶，若 0.75mm 厚适当减少时间，1.5mm 厚适当增加时间）， 同时根据蛋白大小调整电泳时间。
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恒流 |
蛋白大小 |
电泳时间 |
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300mA |
20kDa以下 |
20分钟 |
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20-100kDa |
30分钟 |
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100-200kDa |
45分钟 |
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200kDa以上 |
60分钟 |
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400mA |
20kDa以下 |
15分钟 |
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20-100kDa |
25分钟 |
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100-200kDa |
35分钟 |
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200kDa以上 |
45分钟 |
注意事项
1．使用时注意 1×WB 免降温快速湿转液尽量全部没过转印膜，避免部分没有浸润在转膜液内的蛋白的转膜效果受影响。
2．PVDF 膜在使用前需要浸泡在无水乙醇 30s-60s 以激活。
3．若室内气温高，建议 45 分钟以上的转膜进行冰浴。
4．本产品即配即用，建议使用 2-3 次。正常的 1×WB 免降温快速湿转液为无色透明液体，若放置一段时间后变为棕黄色，应当丢弃，避免影响转膜效果。
5．为了您的安全与健康，请穿实验服并带一次性手套操作。
