逆转录pcr温度

逆转录PCR（RT-PCR）的温度设置取决于使用的逆转录酶和模板RNA的复杂性。

对于大多数逆转录反应，推荐的起始温度为50℃至55℃。这是逆转录酶活性最强的温度范围，可以促进逆转录反应的进行。对于具有复杂二级结构的模板RNA，可能需要将逆转录温度提高至60℃至65℃。这样的温度设置可以避免RNA复杂二级结构对cDNA合成的抑制，从而有效合成高质量的cDNA。

在逆转录反应结束后，通常会进行一个加热步骤以使逆转录酶失活。这个步骤通常在85℃下进行5分钟。这一步骤对于后续需要进行其他实验，比如二链合成等，是必要的。