在ELISA试验中，封闭（blocking）是一种用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程，其目的是减少非特异性结合。脱脂奶粉是一种常用的封闭剂，其作用原理是含有多种蛋白，可以封闭未吸附蛋白的固相载体（比如ELISA板）位点，减少抗体与之结合的概率，避免非特异性结合带来的高背景。需要注意的是，脱脂奶粉的成分复杂，适用范围相对狭窄，并不适用于生物素和碱性磷酸酶标记的抗体系统，且封闭后的载体不易长期保存，因此在试剂盒的生产中较少应用。另外，封闭剂的选择也与试验平台有关，需要根据不同的平台选择相应的封闭剂。
