组织elisa步骤
组织ELISA的步骤如下:
1. 预处理组织样本:将组织样本切成小块,放入匀浆器中,加入适量的细胞裂解液,匀浆,然后进行离心,提取上清液。
2. 包被:将抗原或抗体包被到酶标板孔壁上,然后加入封闭液进行封闭。
3. 加样:将待测组织样本加入酶标板孔中,同时加入适量的阴性对照和阳性对照。
4. 温育:将酶标板在恒温箱中孵育一定时间。
5. 洗板:将未结合的蛋白质洗去,减少非特异性吸附。
6. 加酶:加入酶标试剂,与组织样本中的抗原或抗体结合。
7. 温育:继续孵育一定时间,使酶与抗原或抗体充分反应。
8. 洗板:去除未结合的酶标试剂。
9. 显色:加入底物溶液,使酶与底物发生反应,产生颜色。
10. 测定吸光度值:将酶标板放入酶标仪中,测定各孔的吸光度值,用标准曲线计算待测组织样本中的抗原或抗体浓度。
需要注意的是,不同的组织ELISA试剂盒可能需要使用不同的试剂和操作步骤,具体操作步骤应参考试剂盒说明书或咨询专业人员。