做elisa实验标准曲线不好

ELISA实验标准曲线不好可能有以下原因:

 

1. 标准曲线最高点吸光值偏高,超出仪器检测范围:可能是显色过度,建议根据S1、S2颜色进行判断,当S1、S2深蓝色,有明显梯度,S5有淡蓝色时即可终止。另一种可能是仅作单波长检测,建议最终结果以双波长为最准确。

2. 标准曲线最高点吸光值偏低:可能是标准品反复冻融后活性降低,孵育温度、时间未按说明书要求进行孵育,或者显色时间控制不当。

3. 标准曲线无梯度:可能是显色液加错顺序、酶浓度太高、包被-酶标系统不匹配、酶标仪读数范围不够、样本中有能够催化底物的物质等原因。

 

可以根据这些原因采取相应的方法来解决问题。

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