直接ELISA的原理是将酶标记的抗体或抗原直接与待测物结合，形成夹心复合物，然后加入底物检测酶的活性。具体步骤如下：
1. 将抗原与固相载体连接，洗涤除去未结合的抗原及杂质。
2. 加酶标抗体进行孵育，固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。
3. 彻底洗涤未结合的酶标抗体，此时固相上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4. 加底物反应，直接法主要用于测定抗原。
这种方法的优点是操作流程简短、实验步骤少、无需使用二抗、避免了交叉反应、实验步骤少、操作不易出错。缺点是实验中的一抗需要直接用酶标记，成本相对较高。
