elisa试剂盒检测凋亡率
ELISA试剂盒可以用来检测细胞凋亡率,其原理是检测细胞溶解物中的核小体片段。具体步骤如下:
1. 利用生物标记的小鼠抗组蛋白单克隆抗体和过氧化物酶(-POD)标记的小鼠抗DNA单克隆抗体。
2. 将链霉亲合素包被的微孔板分为两半,一半加入DNA-组蛋白复合物作为阴性对照,另一半加入待测细胞溶解物。
3. 将小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体加入微孔板,与核小体片段形成夹心结构,特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。
4. 加入ABTS底物,溶解缓冲液和温育缓冲液,使底物酶反应生成色产物。
5. 用酶标仪测量405nm处的吸光度值,以阴性对照为标准,计算待测细胞溶解物中的核小体片段浓度,从而评估细胞凋亡率。
需要注意的是,以上仅是大致步骤,实际操作需根据具体试剂盒及其说明书进行。