elisa实验步骤分析

ELISA检测方法的基础是抗原与特异性抗体间结合反应,并通过外部添加的第二抗体与标记抗体间的结合来形成复合物。一般来说,ELISA检测分为以下步骤:涂布、孵育、洗涤、标记、孵育、洗涤、发色和停止反应等过程。

1. 将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。

2. 加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。

3. 加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。

4. 加底物显色。 洗涤除去未结合的抗体及杂质。根据显色情况分析结果。

 

以上步骤的正确与否,都会对ELISA实验结果产生影响,因此要严格执行每一步操作规程。如遇到问题,可寻求专业人士帮助。

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