在ELISA（酶联免疫吸附试验）中，底物是酶结合物的一部分，它会被酶催化成有颜色的产物，以便进行比色测定。
HRP（辣根过氧化物酶）的底物包括OPD（邻苯二胺）和3-(4-羟基)苯丙酸[3-(4-hydroxy)phenly propionic acid，HPPA]，其中OPD氧化后的产物呈橙红色，而HPPA经HRP作用后的产物显荧光，可以用荧光光度计测量。另外，TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）也是HRP最敏感的显色底物，经HRP作用后，产物为黄色，用NaOH终止酶反应后，黄色可稳定一段时间。
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