间接elisa
间接ELISA(Indirect ELISA)是一种常见的ELISA实验方法。其基本步骤是先将抗原结合到ELISA板上,随后分两步进行检测:首先加入检测抗体与抗原特异性结合,随后加入酶标二抗检测并利用底物显色。
间接ELISA的优势在于使用酶标记的二抗来进行检测,因为一抗有多个可结合表位,故而提高了检测灵敏度与准确度。此外,间接ELISA法具有更高的经济性,因为不需要针对每一个特定抗原来设计酶标记抗体。另外,间接ELISA还提供了更大的灵活性,因为不同的一抗能够与单一标记的二抗一同使用。
间接ELISA的缺点是存在交叉反应的可能性(酶标二抗直接与抗原结合),可能会增加背景。同时,与直接ELISA相比,间接ELISA实验多了二抗孵育的步骤,实验周期增长。需要注意的是,间接ELISA法常常被用于测定样品中总抗体的浓度。
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