elisa实验原理及步骤

ELISA实验是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

 

ELISA实验的基本步骤如下:

 

1. 将抗原或抗体包被到固相载体表面,形成固相抗原或抗体。

2. 加入待测样本,样本中的特异性抗体或抗原与固相抗原或抗体结合,形成固相抗原-抗体复合物。

3. 加入酶标记的二抗,与结合的特异性抗体或抗原结合,形成固相抗原-抗体-酶复合物。

4. 加入底物,酶催化底物显色,颜色的深浅与待测抗体的量呈正比。

 

ELISA实验的直接法原理是利用包被抗原,检测抗体或者进行重组蛋白的活性验证,利用蛋白与板材(即微孔板底)通过疏水键、流水/离子键的被动吸附,通过引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合,以及通过表面改性后的亲水键结合等等。

 

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