北京核小体 助力ATP
1. 收集蛋白质样品（Protein sample preparation）：使用细胞裂解液对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解，然后对每个蛋白样品测定其浓度。
2. 电泳（Electrophoresis）：
SDS-PAGE凝胶配制： SDS-PAGE凝胶（分离胶及浓缩胶）可以参考一些文献资料进行配制。
样品处理：在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液）。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积，在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制，100℃或沸水浴加热3～5分钟，以充分变性蛋白。
上样与电泳：待样品冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
另外，制作 Western blot 的详细步骤包括：SDS-PAGE凝胶制备、浓缩胶制备、分离胶制备、加样、转膜、封闭、一抗杂交、二抗杂交、化学发光底物显影等步骤。
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