Western Blot配胶的步骤如下:
1. 将玻璃板、样品梳、制胶架上的橡胶垫,用洗涤剂洗净,用ddH2O冲洗数次,再用乙醇擦拭,晾干。
2. 将两块洗净的玻璃放入制胶架,一定要确保制胶架是平放在桌面上的,不然做出来的胶面会斜。
3. 配置不同浓度的分离胶,可以参考文章中的几个表格。
4. 向玻璃板间灌制分离胶,立即覆一层双蒸水,大约30 min后胶即可聚合(封水一方面可以隔绝空气使胶加速凝固,另一方面可以使分离胶面水平,这一步至关重要)。
5. 配置浓缩胶,配方参照文章中表格配制即可。
6. 将上层双蒸水倒去,灌制浓缩胶,插入样品梳。