western blot流程
Western Blot的基本流程如下：
1. 预处理样品：收集蛋白质样品，使用细胞裂解液，对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解，然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。
2. 电泳：
1. SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶（分离胶及浓缩胶）可以参考一些文献资料进行配制。
2. 样品处理 在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液）。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积，在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制， 100℃或沸水浴加热3-5分钟，以充分变性蛋白。
3. 上样与电泳 ：冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
3. 转膜：将电泳完毕的凝胶上的蛋白转到硝酸纤维素膜（NC膜）或PVDF膜上。转膜条件可以参考有关文献资料进行设置。
4. 封闭：用含有封闭剂（例如脱脂奶粉或BSA）的溶液浸泡膜，以封闭膜上的非特异性结合位点。
5. 抗体结合：根据实验目的，将特异性抗体加入到封闭好的膜上进行免疫反应。
6. 洗膜：用含有洗涤剂（例如Tween-20）的溶液洗去未结合的抗体，以减少非特异性信号。
7. 检测：根据实验目的选择合适的检测方法（如化学发光、荧光、酶联免疫等），对抗体结合的蛋白进行检测。
