western blot的原理及流程
Western Blot的原理是聚丙烯酰胺凝胶电泳，它被用于检测和分析蛋白质等生物分子。具体流程如下：
1. SDS-PAGE电泳：将获得的蛋白质样品通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，对不同分子量的蛋白质进行分离。
3. 转膜：通过转移电泳将凝胶上分离到的蛋白质转印到固相支持物上，固相支持物包括NC（硝酸纤维素）膜、尼龙膜及PVDF（聚偏氟乙烯）膜等。根据被转移的蛋白分子量大小，要选择不同孔径的NC膜。如果靶蛋白的分子量小于10KD，则选用0.22μm的PVDF膜。
3. 杂交：用抗靶蛋白的非标记抗体（一抗）与膜进行杂交，使抗体与靶蛋白特异性结合后，再与经辣根过氧化物标记的二抗结合。
4. 显色：最后用ECL试剂反应，经X线片曝光、显影等一系列反应，达到检测靶蛋白的目的。
Western Blot技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
