western blot步骤
Western blot的实验步骤如下：
1. 收集蛋白样品：使用细胞裂解液，对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解。然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。
2. SDS-PAGE凝胶配制：SDS-PAGE凝胶（分离胶及浓缩胶）可以参考一些文献资料进行配制。
3. 样品处理：在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以减小上样体积，在相同体积的上样孔内可以上样更多的蛋白样品。5X的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液可以参考相关文献资料配制，100℃或沸水浴加热3～5分钟，以充分变性蛋白。
4. 上样与电泳：冷却到室温后，把蛋白样品直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
请注意，进行Western blot实验时请遵照实验室规章制度，佩戴好护目镜，避免试剂和操作带来的危险。如有其他疑问，建议咨询专业人士。
