western blot 原理

Western blot(蛋白质免疫印迹)是一种常用于研究中分离和鉴定蛋白质的技术。它利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)来分离指定样品中包含的各种蛋白质,然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或PVDF膜上,接下来将膜与对感目标蛋白质的特异抗体一起孵育。

 

其基本原理是抗体仅与目标蛋白质结合,因此一般只能看到一条清晰的带,条带的粗细对应于蛋白质量。通过分析特定反应的位置和强度,可以获得目标蛋白在给定细胞或组织匀浆中的表达信息。由于凝胶电泳的高分辨率和免疫的强特异性和高灵敏度,Western印迹分析可检测低至1ng的靶蛋白。

 

Western blot技术现广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。

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