细胞划痕实验流程
细胞划痕实验的操作流程如下：
1. 实验前准备：将所需试剂和器材放入无菌超净工作台，用紫外线照射30min。然后，采用通风机通风3min。取出无菌6孔板，用黑色记号笔在6孔板底部，用直尺比着，均匀的划横线，大约每隔0.5~1cm一道，横穿过孔，每孔至少穿过3条线。每条黑线的上下缘与划痕交叉点作为观察点，这样便于观察。
2. 细胞准备：取出处于对数生长期的健康细胞，吸掉原来的培养液，用无菌PBS清洗细胞。
3. 直线划痕：取出铺满六孔板的细胞，用200ul枪头垂直于细胞表面，由孔一端划向另一端。尽量垂直于背面的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4. PBS清洗细胞：用PBS冲洗细胞3次，除去划下的细胞，加入无血清培养基。
5. 结果观察：在4倍镜下进行拍照，保证划痕居中且垂直，注意背景一致，加入待测样本，设置浓度梯度。可以按照0、6、12、24h时间点取样，拍照。
6. 结果分析：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算细胞间距离的均值或者划痕面积均值。
7. 数据处理：根据实验需要可以按照以下公式计算细胞迁移率或伤口愈合率：
* 细胞迁移率(伤口愈合率)=(初始划痕面积-t时刻划痕面积)/初始划痕面积
* 细胞迁移率(伤口愈合率)=(初始细胞间距离均值-t时刻细胞间距离均值)/初始细胞间距离均值
