细胞划痕实验分析
细胞划痕实验是一种常用的研究细胞迁移、修复和细胞间相互作用的方法。以下是一些分析细胞划痕实验的步骤和要点：
1. 实验原理：细胞划痕实验利用在细胞单层上划痕，并通过延时显微镜定期捕获图像，研究细胞的迁移运动和修复能力。在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，称为“划痕”，划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕”愈合。通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值，可对细胞的迁移能力做出判断。
2. 细胞铺板与接种密度：根据细胞的生长快慢调整接种数量，原则为过夜后细胞能够长满，且一定要铺匀。细胞的接种密度原则一般是过夜为100%融合。若过夜后细胞未100%融合，可以适当延长培养时间，但细胞状态可能逐渐变差。
3. 减少误差：不同孔之间最好使用同一只枪头；枪头要垂直，不能倾斜，划痕时可比着直尺；保持力度一致，尽量一次性划完。
4. 拍照观察点固定：按照孔板背后画线的垂直方向划痕，形成若干交叉点，一次划痕与5条定位线相交，有10个可固定监测点，以解决了前后观察时位置不固定的问题。
5. 降低细胞增殖对迁移造成的假阳性结果的方法：使用无血清或低血清培养基(<2%)可降低细胞增殖对实验结果的影响；选取合适的时间点(如6、12、24小时)检测划痕宽度时，最好不要超过细胞一个周期的时间；如果需要单纯考虑细胞迁移，可以先用丝裂霉素(1 μg/ml)处理1小时，抑制细胞的分裂。
