原代细胞转染
原代细胞转染通常是指将外源性基因导入细胞内的一种专门技术,常用于基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中。
转染方法根据其特点大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类。物理介导包括电穿孔法、显微注射和基因枪等;化学介导则有经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法以及多种阳离子物质介导的技术等;生物介导包括原生质体转染和各种病毒介导的转染技术等。其中,病毒介导的转染技术是目前转染效率最高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势。
在原代细胞的转染过程中,还需要考虑细胞膜的带负电荷的磷脂双分子层,这对大分子物质来说是个不可透过的屏障,因此需要选择合适的转染试剂和条件以实现高效的基因转染。
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