原代细胞培养技术
原代细胞培养的步骤如下：
1. 取材。注意取材的新鲜和保鲜，应严格无菌，防止机械损伤，去除无用组织和避免干燥，应注意组织类型、分化程度、年龄等，作好记录。
2. 分离。对于体内或胚胎组织的细胞，由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。
- 悬浮细胞的分离方法：组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用低速离心，经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，根据需要收获目的细胞。
- 实体组织材料的分离方法：对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。
3. 培养。将分离得到的细胞放入无菌培养皿中进行培养。
4. 传代。待细胞适应体外环境后进行传代培养，再以较低的密度接种和培养。
原代细胞培养过程要求严格的无菌操作，并且需要提供适宜的营养环境，建议在专业人士指导下进行该项操作。
