原代细胞冻存
原代细胞冻存是一个重要的技术,可以长期保存细胞的活力和遗传资源,随取随用。以下是原代细胞冻存的基本步骤:
1. 吸取传代后的细胞悬液,进行离心,去除培养液。
2. 加入冻存液,分装冻存管。
3. 按照标准的冻存程序降温,一般降温速率为-1~-2℃/min,当温度达-25℃以下时,可增至-5~-10℃/min,到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。
冻存管内细胞数目一般为(5~10)×10⁶个/ml,2ml冻存管中一般放1~1.5ml细胞。细胞来源目前主要从临床上捐献材料包括遗体捐献、手术切除样本中获取等,这些临床样本具有最原始的生理与疾病相关性,具有重要的基础研究与临床治疗价值。
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