原代肝细胞培养方法
原代肝细胞培养的步骤如下：
1. 准备相关试剂和器材。乙醇、PBS溶液、小牛血清等，以及解剖剪、吸管等器材。
2. 取材：将乳鼠俯卧位用乙醇进行一次背部消毒，再用消毒的解剖剪剪开背部肋下缘脊柱两侧的皮肤，剖开腹部，取出肝脏放入另一培养皿中，除去其他连带组织，用消过毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝组织3次，每次1~2ml，洗去血污将废液弃于废液杯中。
3. 接种： 用吸管加2滴小牛血清，小心地用弯头吸管前端将组织块轻轻吹打均匀制成悬液，然后仍用吸管前端吸取组织悬液、将其均匀地（组织块之间相距约0.5cm左右）排种在培养瓶底壁上；每个25ml的培养瓶中可接种20块左右。
4. 培养：将培养瓶慢慢翻转，使瓶底向上，加入1~2ml培养液，拧紧瓶盖，做好标记，置37℃恒温箱中培养1~2小时，待组织块略干燥能牢固贴于瓶壁上后，再缓慢翻转培养瓶（尽量注意不要使组织块漂浮起来），另加入培养液2ml左右使其能覆盖组织块，将瓶盖调整在略微松弛状态，继续置37℃恒温箱静放培养。
