星形胶质细胞原代培养的步骤如下:
1. 将新鲜脑组织剖出,用积聚素/液体软膜法进行酶解,使得细胞可以分离开来。
2. 用无菌生理盐水或DMEM/F12将细胞悬液进行洗涤,然后放置在含有足够营养物质的培养基中。
3. 离心收集细胞,用含有10%胎牛血清的DMEM重悬细胞。
4. 将细胞以2.0×10^5个/cm^2的密度接种到培养皿中,将培养皿放入37°C 5%CO~2~湿润培养箱中进行培养。
5. 在培养的第7天更换培养液,到10天左右细胞就能铺满培养皿。
这些步骤仅供参考,不同实验室具体操作可能有所不同。