小鼠肾细胞原代培养

小鼠肾细胞原代培养的步骤如下:

 

1. 做好洗手等准备工作。

2. 取材:颈椎脱臼法处死新生乳鼠,将小鼠放入盛有75%酒精的烧杯中消毒2-3秒,随即携入超净工作台内。在超净工作台内取出小鼠,置于消毒培养皿中,用消毒器械包中的镊子掀起乳鼠腹部皮肤,用解剖剪剪开腹腔,充分暴露腹腔,用另一镊子轻轻夹起肠管,翻置一侧,充分暴露位于腹腔背壁脊柱两侧的肾脏。

3. 清洗和剪切组织:取下双侧肾脏,放入消毒培养皿中,用吸管吸取PBS加入培养皿中,清洗肾脏3次,尽量去掉血污。再将肾组织用解剖剪剪成几块再用PBS漂洗,去净血液为止。

4. 消化:将洗净的组织块移入消毒小瓶中(如毒霉素瓶),加入5~8倍量(体积)的0.25%胰蛋白酶,盖好放入37℃水浴中消化20~30分钟,注意每隔5分钟振摇一次。

 

以上步骤仅供参考,建议按照专业文献或者咨询专业人士进行操作。

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