提取总rna的试剂
总RNA提取是从细胞中同时提取出mRNA、tRNA、rRNA等各类RNA的过程。以下是一种常见的总RNA提取方法，可以用于多种样品类型，例如细胞、组织或血液。
材料：
- 细胞或组织样品
- TRIzol试剂
- 无菌去离子水
- 75％乙醇
- RNase-free管和离心管
步骤：
1. 获取细胞或组织样品，如有必要，用PBS缓冲液冲洗一次以去除细胞培养基或其他污染物。
2. 使用适当的方法（例如机械破碎、致浆器或超声波处理）将样品破碎，并将样品转移至RNase-free离心管中。
3. 向每个离心管中加入1 mL TRIzol试剂。
4. 彻底混合离心管，使细胞或组织样品与试剂充分接触，然后将其静置5分钟以完全溶解细胞膜。
5. 加入200 μL氯仿，再次混合彻底，然后在室温下静置15分钟，以便使DNA和蛋白质在底部形成一个相分离的层。
6. 将样品离心10分钟，以12000 x g在4°C。
7. 小心地将上清移至新的RNase-free离心管中，避免凝固物。
8. 加入等体积的冷的无菌乙醇，混匀并静置5-10分钟，使RNA完全沉淀。
9. 将样品离心10分钟，在12000 x g在4°C下。
10. 尽可能多地去除上清液，但避免碰触RNA沉淀。
11. 将沉淀空干并用RNase-free去离子水或缓冲液溶解。
12. 使用纳米分光光度计或琼脂糖凝胶电泳等方法验证RNA的质量和浓度。
这是一种基本的总RNA提取方法，你可以根据具体的实验要求和试剂的使用说明进行调整和优化。
