组织rna提取试剂
提取组织中的RNA可以通过以下步骤进行:
1. 样品准备:将组织样品取出并立即放入液氮中快速冷冻,或放入RNAlater等稳定液保存。确保样品在冷冻过程中不受到RNA降解的影响。
2. 组织裂解:将冷冻的组织样品用组织研磨器或匡碾研磨,加入裂解缓冲液(如TRIzol),在室温下裂解细胞膜并使RNA释放到裂解缓冲液中。
3. 混合和离心:加入氯仿到裂解缓冲液中,混合均匀,并进行离心,使RNA在酚相和水相中分离。离心时,RNA会沉淀在上层的酚相中。
4. RNA沉淀:将上层的酚相转移到新的离心管中,加入异丙醇沉淀RNA。通过离心将RNA沉淀下来。
5. RNA洗涤:用70%乙醇洗涤RNA沉淀,以去除杂质和其他污染物。
6. RNA溶解:用适当的缓冲液(如RNase-free水或RNase-free的TRIS缓冲液)溶解RNA沉淀,以得到纯净的RNA溶液。
整个过程需要严格操作,尽可能避免RNA降解和外源性RNA的污染,使用RNase-free试剂和耗材,并采取严格的清洁措施。根据具体实验需求和样品类型的不同,可以选择适合的试剂盒和提取方法进行。