细胞总rna的提取
细胞总RNA提取是获得细胞内所有RNA的方法，包括信使RNA（mRNA）、转运RNA（tRNA）、核糖体RNA（rRNA）以及非编码RNA等。
下面是细胞总RNA提取的一般步骤：
1. 收集细胞：收集需要提取RNA的细胞，可以是悬浮细胞或贴壁细胞。细胞可以通过离心或洗涤的方式得到。
2. 细胞破碎：使用细胞破碎缓冲液或其他化学方法，将细胞破碎释放RNA分子。通常的破碎方法包括机械破碎、液氮冷冻-化学破碎等。
3. 暂停RNA降解：由于细胞内存在有核酸内切酶和外源性核酸酶，会导致RNA降解。为了防止RNA降解，细胞破碎后应立即加入RNA保护剂如RNase抑制剂，以保持RNA的完整性。
4. 除去DNA和蛋白质：加入蛋白酶和DNA酶等酶类，将蛋白质和DNA降解并去除，以避免污染RNA提取物。
5. 沉淀RNA：将提取溶液中的RNA沉淀，一般可通过加入酚醇混合物（如酚-氯仿-异丙醇重组溶液）等，使RNA富集在水相中，然后通过离心分离酚相和水相，得到RNA沉淀。
6. 洗涤与纯化：将RNA沉淀物用酒精洗涤去除沉淀剂残留，并用适当的缓冲液溶解RNA。
7. 检测与质量控制：最后，利用吸光光度计或其他RNA检测方法测量RNA的浓度和纯度，同时可以通过电泳或其他方法检查RNA的完整性。
总体而言，细胞总RNA提取的过程基本与氯仿提取RNA的原理类似，但细胞总RNA提取存在一些特殊的步骤，如细胞收集和RNA保护剂添加等。选择适合的提取方法和试剂盒，以及严格控制实验条件，能够得到高质量的细胞总RNA。
