酵母rna的提取

提取酵母RNA的常用方法是酚酸提取法。以下是该方法的一般步骤:

 

1. 收集培养的酵母细胞:从培养物中收集需要提取RNA的酵母菌株的细胞。可以通过离心、洗涤等步骤来收集和处理酵母细胞。

 

2. 细胞破碎:将收集到的酵母细胞用一种破碎方法破碎开来,如使用玻璃珠、液氮冷冻-研磨等方法。破碎细胞的目的是释放细胞内的RNA。

 

3. 酚酸提取:将破碎细胞溶胀液与等体积的酚酸混合。酚酸可以沉淀DNA和蛋白质,而保留RNA在水相中。

 

4. 乙酸沉淀:向酚酸提取物中加入等体积的酸性乙酸,沉淀出RNA。

 

5. 洗涤:用乙酸洗去沉淀中的酚酸和杂质。

 

6. 酒精沉淀:将洗涤后的水相中的RNA用等体积的冷酒精混合,沉淀出RNA。

 

7. 除去酒精:将RNA沉淀物用75%的酒精溶解并去除。

 

8. 纯化:通过使用RNA纯化试剂盒或其他适当的方法,将提取的RNA进一步纯化,去除悬浮残留物。

 

9. 分析:通过光度法或其他RNA浓度和质量分析方法来检测和确定提取的RNA的浓度和纯度。

 

这是一个简要的酵母RNA提取方法,具体的操作步骤可能会根据实验室的具体要求和原材料适当调整。

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