提取rna加氯仿
在某些特定的RNA提取方法中，氯仿是用来去除蛋白质和DNA等杂质的一种溶剂。以下是一种使用氯仿进行RNA提取的基本步骤：
1. 收集血液样本：使用适当的血液收集管（如EDTA抗凝管），采集所需的血液样本。
2. 防止RNA降解：立即将血液样本转移到RNA稳定液中，如RNAlater，以防止RNA的降解。
3. 血细胞分离：将血液样本离心，分离血浆或血清。使用离心机将血液离心，使血细胞沉淀。
4. 溶解红细胞：将血细胞沉淀洗涤一到两次，以去除血浆和血清中的残留污染物。然后，使用适当的裂解缓冲液或裂解剂（如文氏裂解缓冲液或Trizol）溶解红细胞，释放细胞内的RNA。
5. 加入氯仿：将等体积的氯仿（一般是裂解液体积的1/5至1/10）加入样品中。轻轻地混合，以使裂解液和氯仿充分混合。
6. 离心分离：离心样品，在低速离心下（约12,000×g）将上清液（含RNA）与有机相（包含DNA和蛋白质）分离。这个步骤会将含有DNA和蛋白质的有机相分离到底部，而上清液中含有RNA。
7. 提取上清液：小心地将上清液转移到新管中，避免移入底部的有机相。这个上清液中富集了大部分的RNA。
8. 沉淀RNA：将提取得到的上清液加入等体积的异丙醇中，从而沉淀RNA。轻轻地混合后，使用离心机将RNA沉淀下来。
9. 清洗沉淀：用70%乙醇洗涤RNA沉淀，以去除残余的盐和杂质。将乙醇洗涤液加入RNA沉淀中，轻轻地混合后离心洗涤液，然后将沉淀干燥。
10. 溶解RNA：用适当的RNA溶解液（如RNase-free水）溶解沉淀的RNA，并将其储存在适当的低温条件下，如-80℃。
需要注意的是，使用氯仿的RNA提取方法需要小心操作，以避免氯仿和其他有机溶剂对实验者和环境的伤害。同时，需要根据具体的实验要求和方法，适当调整使用氯仿的比例和步骤。建议在进行RNA提取之前，详细阅读和遵循相关的实验方案和操作说明。
