口腔拭子rna提取
口腔拭子RNA提取是一种常用的方法,用于从口腔拭子收集到的细胞中提取RNA。以下是一种常见的口腔拭子RNA提取方法:
1. 准备材料和试剂:包括RNA稳定剂(如RNAlater)、酚/氯仿溶液、异丙醇、洗涤缓冲液等。
2. 收集样本:使用口腔拭子轻轻刮取口腔黏膜表面的细胞,将拭子放入含有RNA稳定剂的收集管中,确保样本充分浸泡在稳定剂中。
3. 保存样品:将样品保存在-20摄氏度或更低的温度下,以确保RNA的稳定性。
4. 细胞破碎:从RNA稳定剂中取出拭子,并将其放入含有酚/氯仿的离心管中。可使用离心机将细胞破碎成细胞裂解液。
5. 分离RNA:将细胞裂解液加入到异丙醇中,使RNA沉淀。然后使用离心机将RNA沉淀下来,并去除上清液。
6. 洗涤RNA:使用洗涤缓冲液洗涤RNA沉淀,去除杂质和残留试剂。
7. 干燥RNA:在室温下或稍微加热的条件下,将RNA沉淀干燥。
8. 溶解RNA:使用RNase-free的水或缓冲液将RNA溶解,以便进行后续的实验。
需要注意的是,口腔拭子RNA提取方法可能因实验目的和所用试剂的不同而有所差异。因此,建议在操作时参考相应的实验方法和试剂说明书,并根据实际情况进行调整。同时,在进行RNA提取前,保持实验台面和仪器的清洁,并注意避免外源性RNA污染。