rna提取的常用方法
常用的RNA提取方法包括:
1. 酚/氯仿法(Phenol/Chloroform Extraction):这是一种传统的RNA提取方法,通过酚/氯仿混合液与细胞裂解混合,离心后RNA在上清液中。然后通过酒精沉淀法将RNA纯化。
2. 列柱法(Column-based RNA Extraction):这是一种比较方便和高效的RNA提取方法。商业化的RNA提取试剂盒(例如Qiagen的RNeasy Kit)常用的列柱方法,利用硅胶柱或磁珠等材料将RNA固定在材料上,并去除其他杂质。然后通过洗涤和洗脱步骤来纯化RNA。
3. 磁性珠法(Magnetic Bead-based RNA Extraction):这种方法利用具有特定亲和力的磁性珠,例如固定在珠子表面的聚合酶链式反应(PCR)引物,选择性地捕获和纯化RNA。细胞裂解后,RNA与磁性珠结合,然后通过磁力分离和洗涤步骤纯化。
4. 膜滤法(Membrane-based RNA Extraction):也叫作Spin column方法,使用特制的膜滤装置(例如Zymo Research的RNA Clean & ConcentratorTM)来捕获和纯化RNA。样品通过膜时,RNA会被滤持在膜上,其他杂质则通过。然后通过洗涤和洗脱步骤来纯化RNA。
5. 环状RNA提取法(Circular RNA Extraction):这种方法专门用于提取环状RNA(circular RNA)。环状RNA通常具有较高的稳定性,传统的RNA提取方法较难很好地提取出来。环状RNA提取方法主要通过消化线性RNA,保留环状RNA,并通过酒精沉淀法纯化。
选择合适的RNA提取方法取决于实验的需求和样品类型。因此,在选择方法之前,请确保清楚自己要提取的RNA类型和实验要求,并参考相应的实验室和厂家推荐的方案。