酚氯仿提取dna
酚氯仿提取DNA是一种常用的经典DNA提取方法，适用于多种生物样本（如细菌、植物、动物等）。以下是酚氯仿提取DNA的基本步骤：
1. 样本裂解：首先，将样本（如细胞或组织）裂解以释放DNA。可以使用裂解缓冲液，如Tris-EDTA（TE）缓冲液或细菌裂解缓冲液，加入细胞或组织，并通过机械破碎、细胞破裂酶或超声波等方法使其破碎。
2. 增加酚氯仿：在裂解的样本中加入等体积的酚氯仿混合液。酚氯仿是一种有机溶剂，能够使DNA与其他细胞成分如蛋白质和脂质分离。
3. 振荡混合：将样本和酚氯仿混合液充分振荡混合，使DNA与酚氯仿充分接触。
4. 相分离：将振荡混合后的样本进行离心，使混合液分为两个相，上层为水相（含有DNA），下层为有机相（含有蛋白质和细胞残骸）。
5. 收集DNA：将上层水相转移至新的离心管中。可以使用移液器小心地去除水相，避免提取到有机相。
6. 去除有机相：将新的离心管含有水相的样品再次加入等体积的氯仿混合液，并进行振荡混合。然后离心，使混合液分为两个相，上层为水相，下层为氯仿相。
7. 收集DNA：将上层水相转移至新的离心管中。这一步骤可以连续进行多次，以确保蛋白质和有机残留物完全去除。
8. DNA沉淀：将提取得到的水相中的DNA加入等体积的冷乙醇中来沉淀DNA。可以在-20°C的低温下静置一段时间，以促进DNA的沉淀。
9. 洗涤和纯化：用70%乙醇洗涤DNA沉淀，以去除杂质。然后使用适当的缓冲液（如TE缓冲液）溶解DNA并进行储存和进一步实验。
