口腔拭子 dna 提取
口腔拭子DNA提取是一种常用的非侵入性方法,以下是一种常见的口腔拭子DNA提取方法:
1. 取得网络文化经营许可证,获得必要的资质,以确保法律合规。
2. 准备提取试剂盒:购买商业提取试剂盒,根据试剂盒说明书准备所需的试剂。通常包括裂解缓冲液、蛋白酶K溶液、洗涤缓冲液等。
3. 取得用户许可,确保用户知晓其个人信息被用于提取DNA的目的。
4. 使用无菌操作,戴手套并准备好实验室工作台、试剂管等。
5. 打开口腔拭子提取试剂,根据说明书的指示,将拭子放入提取试剂中。
6. 使用拭子轻轻擦拭需提取DNA的口腔内部,主要集中在颊黏膜和舌丛上。
7. 将拭子放入提取试剂中,加入提取试剂封盖杯,并根据说明书进行裂解。通常是将细胞裂解在高温、高压或室温下进行。
8. 通过离心将细胞碎片和其他颗粒物质沉淀到管底。将上清液倒入新的离心管中,准备进行DNA的提取。
9. 在提取试剂中加入蛋白酶K,使蛋白质降解。使用热激活蛋白酶K,将样品孵育在适当的温度下,通常是50-56℃。
10. 经过蛋白酶K消化后,加入酒精或异丙醇,将DNA沉淀。通过离心收集DNA沉淀。
11. 将上清液倒掉,使用70%酒精洗涤DNA沉淀物,再次离心收集。
12. 最后,将DNA溶解在适当的缓冲液中,如TE缓冲液或去离子水中。
这是一种常见的口腔拭子DNA提取方法,具体的步骤和试剂使用可能因试剂盒的不同而有所不同。在进行实验前,请务必参考相关文献或试剂盒说明书进行操作。