动物基因组dna提取

动物基因组DNA的提取方法可以根据样本的类型和样本量的不同而有所差异,以下是一种常见的动物基因组DNA提取方法(酚-氯仿法):

 

1. 准备样品:选择合适的动物组织或细胞,如鼠尾、鸟羽、鱼鳞、血液、肌肉等,并将其储存在常规的冷冻条件下。

 

2. 细胞裂解:将样品从冷冻条件转移到冰上,并加入适量的离心管中的裂解缓冲液(含有蛋白酶K和EDTA等),彻底均匀混合。

 

3. 温育和离心:將样品在37°C恒温器中以高速(大约14000 rpm)离心30分钟,以完全裂解细胞并释放DNA。

 

4. 蛋白质沉淀:将相等体积的氯仿添加到裂解混合物中,轻轻混合,然后以高速离心分离上层水相(含DNA)和下层有机相(蛋白质酚相)。 DNA将在上层水相中。

 

5. DNA沉淀:将水相(含DNA)转移至新的离心管中,加入等体积的异丙醇,并加入氯化钠(浓度为0.3M),轻轻混合。然后在-20°C的冷冻条件下,沉淀DNA 30分钟。

 

6. DNA洗涤和纯化:用70%乙醇洗涤DNA沉淀物,然后用无菌的ddH2O重溶解。

 

7. DNA测定:使用比色法或荧光法,通过测定DNA的光密度来确定DNA浓度和纯度。

 

这是一种常见的动物基因组DNA提取方法的概述,具体过程中的药品和试剂的使用量、浓度以及操作步骤可能因研究目的和实验要求而有所不同。因此,最好参考具体的实验方案或优化该方法以适应特定样品类型和需求。

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