唾液提取dna
唾液提取DNA是一种常见且非侵入性的方法,以下是一种常用的唾液DNA提取方法:
1. 收集唾液样品:让被测者用清洁漱口水漱口30秒,然后将唾液吐入一个试管或采集器中。可使用采集棉签或唾液采集器等工具。
2. 破碎细胞膜:将采集到的唾液样品进行离心,去除上清液。使用漂浮在上清液上方的唾液细胞沉淀,并加入细胞破碎缓冲液(如含有蛋白酶K的缓冲液)。
3. 消化蛋白质:加入蛋白酶K,它能够降解蛋白质,消化细胞中可能存在的核酸酶。将样品在适当的温度下孵育,使蛋白质被彻底消化。
4. 提取DNA:加入酚/氯仿混合物,轻轻混匀,使DNA在混合液中溶解。离心样品,DNA会从上清液中沉淀到接触界面上。将上层液体转移到新的离心管中,加入同体积的异丙醇,轻轻混匀,使DNA沉淀出来。
5. 洗涤和纯化:用70%乙醇洗涤DNA沉淀,去除杂质和残留溶剂。然后离心,去除乙醇。最后用适当的缓冲液(如TE缓冲液)溶解DNA,得到纯化的DNA样品。
以上步骤仅为简要概述,实际操作时可以依据实验室所用试剂和设备的具体要求进行适当调整和修改。