唾液dna提取方法
唾液DNA提取是一种非侵入性且简单的DNA提取方法,以下是一种常用的唾液DNA提取方法:
步骤:
1. 收集唾液样品:使用唾液采集器或漱口液收集器收集2-5毫升的唾液样品。确保没有食物或其他污染物进入样品中。
2. 细胞裂解:将唾液样品转移到一个离心管中,加入约2倍体积的裂解缓冲液(如盐EDTA缓冲液),混匀。裂解缓冲液中的EDTA可以帮助稳定DNA,防止酶的活性。
3. 加热裂解:将样品在水浴中或热盖下加热至65-70℃,放置5-10分钟。加热能够破坏细胞壁和细胞膜,释放DNA。
4. 酶处理:加入蛋白酶K或其他适用的蛋白酶,使其达到适当的浓度。蛋白酶能够降解蛋白质,去除细胞裂解过程中释放的蛋白质污染。
5. 混匀和离心:用比色皿或试管摇床轻轻混匀样品,然后离心以沉淀细胞残渣和其他杂质。
6. DNA沉淀:将上清转移到新的管中,加入相应体积的冷乙醇(约2倍体积)或其他沉淀试剂,混匀。冷乙醇会使DNA沉淀下来。
7. 离心和洗涤:将管子置于低速离心机中,离心10-15分钟使DNA沉淀到管底。去除上清,加入70%的乙醇洗涤一次,离心片刻,去除洗涤液。
8. 干燥和溶解:将DNA沉淀物晾干,通常在室温下空气干燥10-20分钟。最后,用适当的溶解液(如TE缓冲液)溶解干燥的DNA沉淀物。
以上是一种常见的唾液DNA提取方法,该方法简单易行,可以用于一般的分子生物学实验和遗传分析。