酵母双杂交文库构建和筛选
酵母双杂交文库构建和筛选
服务介绍
酵母双杂交是目前研究蛋白-蛋白相互作用的一种重要方法,具有简便、灵敏、高效等特点,是一种利用酵母遗传学方法在真核生物细胞体内研究蛋白质间相互作用的非常有效的分子生物学技术,可有效的用来分离能与已知靶蛋白相互作用的蛋白质的编码基因。转录因子通常含有两个独立的结构域:DNA结合域(BD)和转录激活域(AD),只有当这两种结构域共同作用时才能使转录正常进行。利用此特性,可以分别使BD与AD同“诱饵”蛋白(X)和“猎物”蛋白(Y)形成融合蛋白,一般把用来进行筛选的目的蛋白称为“诱馆”蛋白,而筛到的阳性克隆称为“猎物”蛋白。单独的BD与AD蛋白质游离于细胞中不同的位置而分开,不能激活报告基因的转录。如果两种蛋白X和Y可以发生相互作用,就能使BD与AD在空间上充分接近,从而激活报告基因的转录。该技术已被广泛用于蛋白质组学、细胞周期调控、细胞信号转导和肿瘤基因表达等领域的研究中。
服务内容
我们提供
提供详细的、完整的实验报告,清晰的实验图片,筛选结果的测序结果,质粒等