甲基化检测
甲基化检测
服务介绍
DNA 甲基化是表观遗传学（Epigenetics）的重要组成部分，是最具特点的表观遗传学修饰，在人的正常发育、X 染色体失活、衰老以及许多人类疾病（如发育畸形、癌症、心血管疾病、糖尿病和神经心理失调等）发生过程中发挥重要作用。DNA 甲基化是在DNA 甲基化转移（DNMTs）的作用下使CpG 二核苷酸5' 端的胞嘧啶转变为5' 甲基胞嘧啶，在基因组的某些区域中，通常位于基因的启动子区或是第一个外显子区，CpG 序列密度很高，可以达均值的5 倍以上。
服务内容
1、BSP法
亚硫酸氢盐处理后测序法（bisulfite sequencing PCR,BSP）是检测基因甲基化的经典方法，其原理为：用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶（C）被转化为尿嘧啶（U）而甲基化的胞嘧啶则不变。用亚硫酸氢盐处理基因组DNA，所有未发生甲基化的胞嘧啶被转化为尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不变；随后在CpG岛两端设计引物进行PCR扩增，将目的产物纯化后进行TA克隆，每个克隆挑取阳性克隆测序，最后将测得的序列与原始序列比对，统计甲基化位点及数量，并分析甲基化程度。
2、MSP法
重亚硫酸盐处理DNA后，基因组DNA发生的由甲基化状态决定的序列改变，随后进行引物特异性的PCR。MSP中设计两对引物，一对结合处理后的甲基化DNA链（引物对M），另一对结合处理后的非甲基化DNA链（引物对U）。检测MSP扩增产物，如果用引物M能扩增出片段，则说明检测位点存在甲基化；若用引物U扩增出片段，则说明被检测的位点不存在甲基化。
我们提供
原始数据、结果分析及完整的实验步骤
