反转录以什么为引物

在反转录反应中,通常采用随机引物或特定引物作为反转录的引物。

 

1. 随机引物:随机引物是一系列不具有特异性的短序列,它们可以与RNA模板的任意位置结合。因此,随机引物可以在整个RNA模板上均匀地进行引物扩增,适用于不了解或希望获得全面覆盖的RNA反转录反应。例如,常见的随机引物有随机六聚核苷酸(NNNNNN)或随机十六聚核苷酸(NNNNNNNNNNNNNNNN)。

 

2. 特定引物:特定引物是设计用于特定RNA序列的引物。这些引物需要在已知RNA序列的特定位置上匹配,并用于选择性地反转录该特定RNA。使用特定引物可以提高目标RNA的特异性和特定性。例如,根据已知目标RNA序列设计的引物或重点选择已知细菌/病毒基因序列的引物。

 

在反转录反应中,可以使用随机引物和特定引物的混合物,以在综合性和特异性之间取得平衡。可以根据实验需要,选择合适的引物组合。

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