PDX模型建立步骤
PDX(Patient-Derived Xenograft)模型是一种将人类肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠体内的实验模型。以下是建立PDX模型的一般步骤:
1. 肿瘤组织采集:从手术切除的肿瘤组织中,尽快采集新鲜、健康的肿瘤组织样本,并迅速将其转移到细菌无菌的培养基中。
2. 组织切割和处理:将采集到的肿瘤组织切割成小块(通常为1-2mm³),可以使用剪刀或刀片工具进行切割。将切割好的组织放入培养基中进行处理,包括用消化酶(如胰酶等)消化组织以提取单细胞。
3. 移植到小鼠体内:将处理好的肿瘤组织单细胞或小块组织悬浮于适当的培养基中,并注射到免疫缺陷小鼠(如裸鼠、NSG小鼠等)的体内。注射可以选择皮下、腹腔或经静脉注射等方式。
4. 观察与监测:持续观察和监测移植物在小鼠体内的生长情况,包括肿瘤的体积、生长速率、转移情况等。可以使用生物成像仪器或其他适当的方法进行监测。
5. 维持与传代:随着时间的推移,观察到的肿瘤可能会发生生长停滞或逐渐消失。如果需要继续研究,可以将新一轮移植物从原始PDX模型中提取并移植到其他小鼠中,以传代并继续研究。
需要注意的是,建立PDX模型需要严格遵循动物实验的伦理规范和操作指南,确保动物福利和实验可靠性,并且通常需要获得相关机构的批准。