流式细胞仪原理

流式细胞仪基于流式细胞术的原理工作,其主要原理包括细胞流式、光散射和荧光检测。

 

流式细胞仪的工作过程如下:

 

1.细胞流式:细胞悬浮液通过细胞注射器注入流式细胞仪的样品室,然后通过流体系统在细胞仪中形成单个细胞流。细胞流速和流密度均可通过控制样品注射速度和流体压力进行调节。

 

2.光散射:细胞流经过激光束,光束与细胞相互作用时,部分光会被细胞散射。光散射的特性与细胞的大小、形状和内部结构等有关。流式细胞仪通常使用两个光散射通道,即前向散射(FSC)通道和侧向散射(SSC)通道,用于检测细胞的前向散射光和侧向散射光。

 

3.荧光检测:细胞可以被荧光染料标记,荧光染料可以与特定的细胞成分或分子结合,从而提供有关细胞的信息。流式细胞仪使用激光器激发标记物发出的荧光,并将荧光信号分别通过不同的滤光片和检测器进行收集。每一个荧光通道可以检测一个或多个染料的荧光信号,以获得特定细胞成分的信息。

 

4.数据分析:流式细胞仪通过探测器将荧光信号和散射信号转换为电信号,然后传输到连接的计算机上进行数据记录和分析。数据分析软件可以对细胞的散射信号和荧光信号进行解析,并生成直方图、散点图和统计图等,以评估细胞的特征和表型。

 

总结起来,流式细胞仪利用细胞流式、光散射和荧光检测的原理,能够对单个细胞进行快速、准确的检测、分析和分选,从而获得有关细胞的多个参数和信息。

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