流式细胞
流式细胞术(flow cytometry)是一种常用的细胞分析和分选技术,通过将单个细胞以单个细胞悬浮形式通过流式细胞仪进行检测和分析。其基本原理涉及以下几个方面:
1. 细胞标记:将目标细胞进行标记,可以使用荧光染料、抗体或其他标志物。荧光标记通常以特定单克隆抗体与细胞表面分子结合为基础,不同荧光染料的特定波长能够识别不同标签的细胞。
2. 细胞悬浮状态:待分析的细胞要以单细胞悬浮状态存在,以便能够单独传递至流式细胞仪。这通常通过细胞消化和筛选步骤来实现。
3. 流式细胞仪测量:将标记的细胞悬浮液通过流式细胞仪,细胞在通过时被定向到一束激光中,由激光激发细胞内的荧光标记物产生的特定信号,例如荧光发射或衍射光散射。流式细胞仪通过不同的光学器件将这些信号捕捉并检测。
4. 数据分析:流式细胞仪会记录和收集从每个细胞传递过的数据,包括荧光染料的强度、大小和形态特征等。这些数据可以通过流式细胞仪上的计算机软件进行分析和解释,包括细胞群的数量、荧光染料表达的级别和比例等。
流式细胞术可以用于多种应用,包括细胞表型分析、细胞周期分析、蛋白质表达定量、细胞凋亡及增殖分析、干细胞研究等。它的高通量、快速和高灵敏度的特点使其在生物医学研究、临床诊断和药物开发等领域得到广泛应用。