单克隆细胞分选

单克隆细胞分选是指利用单克隆抗体的特异性与细胞表面分子结合,通过流式细胞术将特定细胞从混合细胞群中分选出来。它主要用于从体外或体内样本中分离和纯化特定类型的细胞,以进行进一步的研究和应用。

 

单克隆细胞分选的步骤如下:

 

1. 样品制备:收集细胞样品,如血液、组织等,并进行细胞悬浮处理,使其成为单个细胞的悬浮液。

 

2. 细胞表面标记:利用具有特异性的单克隆抗体对目标细胞表面分子进行标记。这些抗体一般与荧光染料结合,以便在流式细胞仪中检测和分离。

 

3. 流式细胞术测量:将样品中的细胞通过流式细胞仪流动,激光器激发标记的荧光染料,并测量细胞发射的荧光信号。探测器捕获这些信号并转换为电流脉冲。

 

4. 设置门控:根据荧光信号的强度和位置,通过数据分析软件设定门控来筛选出特定细胞群。例如,可以通过设定表面标记物的双荧光门控来选择具有特定表面分子的细胞。

 

5. 分选:根据门控设置的结果,将特定细胞从样本中进行分选。这可以通过流式细胞术仪器的高压系统或磁性珠等方法来实现。一旦分选完成,被选择的单克隆细胞可以用于进一步的研究,如克隆扩增、功能分析、基因测序等。

 

单克隆细胞分选可用于诸如免疫学研究、肿瘤学研究、造血干细胞移植、单克隆抗体生产等领域。它可以帮助研究人员获得高纯度的特定细胞群,从而更深入地探索其功能和应用。

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