cNDA末端快捷克隆

cDNA末端快捷克隆是一种用于快速克隆cDNA末端序列的方法。它基于RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术,但经过了简化和优化,可以更快地进行实验操作。

 

cDNA末端快捷克隆的基本步骤包括:

 

1. 反转录:使用反转录酶将RNA转录为cDNA,并在反应过程中加入适当的引物(如oligo(dT)引物)。

 

2. cDNA末端加以扩增:使用适当的引物和PCR反应条件,将cDNA末端扩增。

 

3. 连接:使用特殊的适配体将扩增的cDNA末端连接到克隆载体上。

 

4. 转化:将连接产物转化至大肠杆菌等宿主细胞中,形成克隆。

 

相对于传统的RACE技术,cDNA末端快捷克隆省略了许多繁琐的步骤,减少了实验时间和操作复杂性。它适用于快速克隆和分析cDNA的末端序列,特别适用于筛选具有特定功能的基因片段,或者用于研究基因表达调控和功能解析等方面。

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