rna干扰发生过程
RNA干扰发生的过程可以分为引导步骤和靶向步骤。
引导步骤:
1. siRNA的合成或miRNA的产生:在细胞内,长RNA前体经过一系列酶的催化,被剪切成为短的siRNA或miRNA。siRNA一般由外源性RNA病毒或转座子等产生,而miRNA则是由内源性基因转录而来。
2. 两链分子的分离:合成的siRNA或miRNA是双链结构,其中的引导链和被抑制的靶标mRNA互补,另一链是保护链。通过辅助蛋白的帮助,双链RNA被解离为单链结构,使引导链暴露出来。
靶向步骤:
1. 引导链与目标mRNA的配对:引导链通过互补碱基配对,与目标mRNA上的特定序列结合,形成RNA诱导沉默复合物(RISC)。引导链通常与目标mRNA的3'非翻译区域互补结合,也可以与编码区域结合。
2. 复合物的作用:RISC复合物通过引导链与目标mRNA的配对,执行以下两种可能的功能:
a. 切割降解:当引导链与目标mRNA完全互补时,RISC复合物中的内切酶活性将目标mRNA切割为不活性的短断片,导致该mRNA的降解。
b. 抑制翻译:当引导链与目标mRNA的互补区域不完全匹配时,RISC复合物中的蛋白质成分会抑制目标mRNA的翻译过程,从而阻断目标蛋白的合成。
总结起来,在RNA干扰中,siRNA或miRNA通过引导链与目标mRNA的靶标序列结合,形成RISC复合物。这个复合物会进一步参与目标mRNA的降解或转译后调控,从而实现对目标基因表达的调控作用。