GSTpulldown实验流程
GST pull-down实验流程一般包括以下步骤：
1.准备GST-tagged蛋白质：将目标蛋白与GST标签融合，在表达宿主中过量表达，并将融合蛋白质提取纯化。可以使用GST-fusion蛋白质的表达载体进行转染或感染目标细胞。
2.细胞裂解：收集经过适当处理的细胞，并使用合适的裂解缓冲液将细胞裂解，释放出GST-tagged目标蛋白及其互作蛋白。
3.制备GST结合树脂：将GST结合到合适的树脂上，例如谷氨酰丙氨酸（Glutathione）或其他具有亲和力的树脂。可通过亲和层析树脂购买或自制。
4.样品处理：将细胞裂解物与制备好的GST结合树脂进行充分混合，使目标蛋白及其互作蛋白与树脂结合。
5.树脂洗脱：通过洗涤的过程去除非特异性结合的蛋白质，使用适当的缓冲液进行洗涤，例如盐洗脱或其他洗脱缓冲液。
6.洗脱蛋白质：经过洗脱后，目标蛋白及其互作蛋白会被洗脱到洗脱缓冲液中。洗脱得到的样品可以进行后续的蛋白质分析。
7.蛋白质分析：可以使用SDS-PAGE凝胶电泳、Western blotting、质谱分析等技术来分析洗脱得到的蛋白质样品，确定目标蛋白及其互作蛋白的存在和结构。
！请注意，在实验过程中应该严格遵守实验操作规范和相关安全操作手册，确保实验的安全性和准确性。
