elisa直接法和间接法区别

ELISA(酶联免疫吸附测定)是一种常用的免疫学实验技术,可用于检测和定量特定抗原或抗体的存在。ELISA有两种常见的方法:直接法和间接法。

 

直接法:

- 在ELISA直接法中,待测样本直接与特异性酶标记的一抗(通常是兔抗)结合。因此,该方法只需要一个抗体的参与。在实验中,首先在微孔板上涂覆捕获抗体,然后加入待测样品。待测物中的特定抗原或抗体与捕获抗体结合。随后,酶标记的抗体会与待测物成复合体,通常在反应停止后加入底物和反应停止液。

 

间接法:

- 在ELISA间接法中,特异性抗原或抗体首先与涂覆在微孔板上的捕获抗体结合。然后,检测抗体(次级抗体)与这些复合物结合,通常是与酶或其他信号物质标记的抗体。因此,该方法涉及两个抗体的参与。在实验中,首先在微孔板上涂覆捕获抗体,然后加入待测样品。待测物中的特定抗原或抗体与捕获抗体结合。随后,加入标记有酶或其他信号物质的检测抗体,它会与待测物形成复合物。最后加入底物和反应停止液。

 

两种方法的选择取决于实验的目的和所使用试剂盒的要求,以及所检测物质的性质等因素。直接法对于特异性较强的试样通常更适用,而间接法通常对试样中特异性较弱的抗原或抗体更敏感。

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